《树龄等生产因素及储存期对毛橘红总黄酮影响规律研究》

通过《树龄等生产因素及储存期对毛橘红总黄酮影响规律研究》学习一下化橘红的知识：

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【摘要】： 目的:通过天堂嶂GAP基地不同树龄、生产区毛橘红样品主要质量指标的比较分析以及不同储存时间样品的主要质量指标分析,探讨树龄、生产区、储存期对毛橘红质量的影响,为毛橘红GAP基地的规范建设和临床用药提供科学依据。

方法:通过含量比较分析确定索氏提取法与超声波提取法提取毛橘红中柚皮苷、野漆树苷的差异,经统计学处理后确定可行的提取方法;再利用正交试验设计优化筛选出的超声法提取法工艺参数。应用优化工艺后的超声提取法提取毛橘红样品,分别采用紫外分光光度法和RP-HPLC法测定其总黄酮含量和柚皮苷含量,比较毛橘红样品不同入药部位黄酮类物质的差异,以及生产区与树龄对毛橘红总黄酮类物质含量的影响。并采用紫外分光光度法和RP-HPLC法分析室温下储存期内各时间点(分别于0个月、1个月、2个月、3个月、6个月、9个月、12个月,)毛橘红总黄酮、柚皮苷、野漆树苷含量,将结果与0月比较以确定药材的最佳储存期限。

结果: 1.两种方法提取毛橘红黄酮类物质的比较分析显示,验证试验中超声法提取柚皮苷含量均值为28.36%、野漆树苷含量为0.288%;索氏法提取柚皮苷含量为26.76%、野漆树苷含量为0.243%。超声提取方法所得提取液柚皮苷、野漆树苷含量均高于索氏提取法,且经统计学处理,其差异P值均大于0.05水平,有显著性意义。

2.正交试验设计优化筛选出的超声法提取法工艺参数,其最佳工艺为加甲醇50ml,超声提取30min,提取1次即可。经工艺验证,测得三批上天堂产区毛橘红样品中柚皮苷平均含量为27.33%,RSD为1.13%。

3.所纳入研究的化州柚样品含量测定结果显示,总黄酮含量叶中最高为13.9%,果中最高为32.34%,花中最高为19.92%;柚皮苷含量变化规律与总黄酮一致,而叶中野漆树苷含量最高为1.56%,果中野漆树苷含量最高为4.5%,花中野漆树苷含量最高为1.13%。

4.四个产区化州柚果及花中总黄酮和柚皮苷分析结果显示,果和花中总黄酮含量均以上天堂生产区为最高,分别达到32.34%,19.92%;果中总黄酮含量最低为农中生产区,为11.54%;花中总黄酮含量最低为大茶岭生产区,为15.74%。柚皮苷含量高低变化规律同总黄酮,果和花中也均以上天堂生产区最高,分别达到23.83%,13.37%;果中柚皮苷含量最低为农中生产区,为6.42%;花中柚皮苷含量最低为大茶岭生产区,为10.69%。

5.同一生产区不同树龄毛橘红样品测定结果显示,总黄酮以2005年(四年生)采者为最高,达到23.78%;2007年(六年生)采样品最低,只有11.54%。柚皮苷含量变化规律与总黄酮较一致,以2005年(四年生)采毛橘红样品为最高,达15.53%;2007年(六年生)采毛橘红样品最低,只有6.42%。

6.于0个月、1个月、2个月、3个月、6个月、9个月、12个月取样品分别测定总黄酮、柚皮苷和野漆树苷百分含量。毛橘红药材储存期分析结果显示,在室温条件下毛橘红黄酮类物质含量稳定,同一样品总黄酮、柚皮苷、野漆树苷含量基本不变。

于初次(0个月)测得2007年采自大茶岭生产区毛橘红样品中总黄酮含量为11.88%,柚皮苷含量为7.58%,野漆树苷含量为1.21%。末次(12个月)测得其总黄酮含量为12.21%,柚皮苷含量为7.87%,野漆树苷含量为1.34%。 于初次(0个月)测得2007年采自农中生产区毛橘红样品中总黄酮含量为11.11%,柚皮苷含量为5.75%,野漆树苷含量为0.74%。末次(12个月)测得其总黄酮含量为11.47%,柚皮苷含量为5.87%,野漆树苷含量为0.73%。 于初次(0个月)测得2007年采自田子嶂生产区毛橘红样品中总黄酮含量为17.36%,柚皮苷含量为11.09%,野漆树苷含量为1.12%。末次(12个月)测得其总黄酮含量为17.74%,柚皮苷含量为12.04%,野漆树苷含量为1.21%。

结论:

1.对于毛橘红中黄酮类物质的提取,超声提取法显著优于药典收载的索氏提取法,而且超声法更加简便快捷高效,可将该法作为毛橘红药材中黄酮类物质提取的首选方法之一。

2.通过正交试验优选出的最佳工艺,经验证后测定柚皮苷百分含量数据结果稳定,表明该工艺合理可行。故本研究均采用优选后的超声提取法工艺参数处理毛橘红样品。

3.不同生产区的毛橘红样品,果中总黄酮含量差异较大,最高者为上天堂生产区毛橘红样品,最低为农中生产区采者;花中总黄酮含量最高者也是上天堂生产区毛橘红样品,最低的为大茶岭生产区样品。柚皮苷含量变化规律同总黄酮,果中最高者为上天堂生产区毛橘红样品,最低为农中生产区采者;花中含量最高为天堂生产区毛橘红样品,最低的为大茶岭生产区样品。结果证实同一产地不同生产区毛橘红中黄酮类物质含量有显著差异,上天堂生产区产毛橘红样品质量为最佳。

4.同一产地不同生产区毛橘红样品黄酮类物质含量有显著差异,提示生产区的小环境可显著影响毛橘红的质量;上天堂生产区毛橘红样品质量最优,提示应当对上天堂生产区的生态环境进行系统分析,找出适于培育优质毛橘红药材的影响因素。

5.树龄(以农中区采毛橘红幼果外果皮为例)对毛橘红总黄酮含量影响较大,含量最高为2005年(四年生)采毛橘红幼果,最低为2007年(六年生)采毛橘红幼果。对柚皮苷含量变化的影响规律与总黄酮一致,也为2005年采毛橘红幼果最高,2007年采毛橘红幼果为最低。结果表明同一生产区内,不同树龄母树所采的毛橘红幼果中黄酮类物质差别较大。因此在毛橘红中黄酮类物质影响因素研究中,可认为树龄是其影响因素之一。提示需扩大取样范围,进一步验证本结论。

6.从产区、树龄等因素对毛橘红中黄酮类物质含量影响规律可以得出,总黄酮含量变化规律与柚皮苷较一致,而且实验数据结果也进一步表明了毛橘红中黄酮类物质以柚皮苷为主要成分,而野漆树苷只占总黄酮物质总量的很少比例。因此,对于毛橘红药材的质量控制指标的选择,可选总黄酮含量的测定,和监控柚皮苷的含量即可控制药材的质量,而达到保证临床用药安全的目的。

7.在制定的最佳毛橘红药材储存期内,对于所监测的2007年采自不同产区的三个毛橘红幼果样品中总黄酮、柚皮苷及野漆树苷含量均基本稳定。因此,暂定毛橘红的储存期为1年。在此基础上,可延长毛橘红药材的考察时限,继续进行稳定性考察,据此确定毛橘红药材的有效期。

8.本次稳定性实验测定的毛橘红样品,其中的柚皮苷含量最低为5.75%,显著高于2005版《中国药典》一部规定的不得低于1.5%的要求,符合药典规定。提示应考虑制定更适合的毛橘红质量标准,以更加合理的控制化橘红药材质量标准。

【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R284.1

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原来该文章是硕士论文。

生物总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。

具有对造血系统的保护作用、对免疫系统的保护作用、清除自由基、抗氧化作用、保护DNA的作用功效。

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